Wnt3a对肝星状细胞增殖活化以及转化生长因子β/Smad表达的影响

目的 研究Wnt3a对肝星状细胞(HSC)的增殖、活化以及转化生长因子(TGF)β/Smad表达的影响. 方法 重组Wnt3a刺激HSC后,用EDU法测定其对HSC增殖的影响;用Westem blot法检测HSC表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGFβ 1、Smad3和Smad7的蛋白水平并比较四者之间的关系,多组间数据的比较用单因素方差分析,双变量相关分析研究数据间相关性.结果 200 ng/ml Wnt3a刺激HSC24h后,其增殖率达到最大(63.00％±2.30％),显著高于未处理组、50 ng/ml、100 ng/ml及150 ng/ml组(P值均＜0.05),而和250、300ng/ml组的差异无统计学意义(P值均＞0.05);随着Wnt3a浓度的增加和刺激时间的延长,HSC表达α-SMA、TGFβ1和Smad3的蛋白水平也随之升高,均在300 ng/ml刺激48h后达到最大值(与3-磷酸甘油醛脱氢酶的灰度比值分别为1.0860±0.0101、1.0346±0.0118、1.0306±0.0122),而Smad7的蛋白水平却随之降低,在300ng/ml Wnt3a刺激48h后达到最小(与GAPDH的灰度比值为0.7736±0.0139),差异均具有统计学意义(P值均＜0.05),并且α-SMA的蛋白表达与TGFβ 1、Smad3的蛋白表达呈正相关(r=0.968,P＜ 0.05;r=0.997,P＜0.01),而和Smad7的蛋白表达呈负相关(r=0.960,P＜0.05).结论 重组Wnt3a能促进HSC的增殖、活化,并上调TGF β/Smad的表达,可能对肝纤维化的形成具有促进作用.     

卒中后抑郁患者的认知功能与血浆同型半胱氨酸水平的关系

目的:了解卒中后抑郁患者(PSD)认知功能障碍的发生比例,了解卒中后抑郁患者的认知功能与血浆同型半胱氨酸(Hcy)的关系。方法:选取卒中后抑郁患者152例,脑梗死患者150例和正常对照组140例作为研究对象,分别抽取空腹静脉血3ml,离心后分离血浆,用高效液相色谱法(HPLC)测量Hcy值,用简易精神状态检查(MMSE)评定各组患者的认知功能,分析认知功能障碍在卒中后抑郁患者中间的发生比例,分析PSD患者的认知功能与Hcy的关系。结果:用MMSE评定PSD组认知功能障碍89例(58.55%),脑梗死组认知功能障碍78例(52.00%),正常组认知功能障碍36例(25.71%),三组MMSE总分分别为(17.42±5.20)分、(21.31±2.32)分和(23.37±10.29)分,差异具有显著性(P<0.05)。其中在记忆力和注意力计算力方面PSD组明显低于脑梗死组和正常对照组。PSD组Hcy水平(23.68±10.29)μmol/L明显高于脑梗死组(16.31±6.40)μmol/L和正常组(12.41±4.63)μmol/L,差异具有显著性(P<0.01)。Hcy水平与PSD组MMSE总分、性别、记忆力和注意力计算力呈负相关,相关系数分别为-1.236、-0.709、-0.680和-2.064。结论:卒中后抑郁患者存在认知功能障碍且发生比例较高,Hcy水平升高可能是PSD认知功能障碍的危险因素,其中对PSD患者的记忆力和注意力计算力有着较大的影响。     

不同肥胖程度儿童血清Apo A5、SIRT4 水平 与糖脂代谢及胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨不同肥胖程度儿童血清Apo A5、人去乙酰化酶4（SIRT4）水平,以及与糖脂代谢 及胰岛素抵抗的相关性。方法 选取2016 年1 月—2018 年8 月新乡市中心医院收治的肥胖儿童102 例作为 肥胖组,参照体重指数（BMI）将患者分为轻度肥胖组、中度肥胖组和重度肥胖组。同期于该院随机选取50 例健康体检儿童作为对照组。收集各组临床病历资料,分析肥胖儿童BMI 影响因素及肥胖儿童血清Apo A5、 SIRT4 与糖脂代谢、胰岛素抵抗及BMI 的关系。结果 肥胖组BMI、腰围、臀围、甘油三酯（TG）、总胆 固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、空腹胰岛素（FINS）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）高于对照组（P <0.05）, 高密度脂蛋白（HDL）、Apo A5 及SIRT4 水平低于对照组（P <0.05）;重度肥胖组和中度肥胖组BMI、腰围、 臀围、TG、TC、LDL、FINS 及HOMA-IR 高于轻度肥胖组（P <0.05）,且重度肥胖组高于中度肥胖组（P <0.05）; 重度肥胖组和中度肥胖组HDL、Apo A5 及SIRT4 水平低于轻度肥胖组（P <0.05）,且重度肥胖组低于中度 肥胖组（P <0.05）。多重线性回归分析显示,腰围、臀围、TG、TC、LDL、FINS、HOMA-IR 是影响儿童 BMI 的危险因素（P <0.05）,HDL、Apo A5 及SIRT4 是儿童BMI 保护因素（P <0.05）。肥胖儿童血清Apo A5、SIRT4 与BMI、FINS、TG、TC、LDL 及HOMA-IR 均呈负相关（P <0.05）,与HDL 呈正相关（P <0.05）。 结论 血清Apo A5、SIRT4 表达下调与儿童肥胖密切相关,早期检测可反映儿童肥胖程度及糖脂代谢紊乱和 胰岛素抵抗,从而为改善肥胖儿童预后提供指导。     

解酒药对大鼠心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的初步研究

目的 通过大鼠心肌缺血再灌注模型研究解酒药对缺血再灌注（IR）损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠分为IR＋生理盐水对照组、IR＋解酒药组、IR＋解酒药＋cyanamide（乙醛脱氢酶2抑制剂,氨基氰,CH2N2）组.伊文思蓝和TTC染色评估心肌梗死面积,TUNEL法测定缺血再灌注区域心肌细胞凋亡情况,Western blot测定分析内质网应激相关蛋白Grp78和Chop含量变化以及凋亡相关蛋白Caspase12含量变化.结果 解酒药减轻心肌梗死面积,而cyanamide的加入部分抵消了解酒药对心肌缺血再灌注的保护作用[IR＋生理盐水对照组：（57.72±6.52）％;IR＋解酒药组：（35.59±5.77）％;IR＋解酒药＋cyanamide组：（46.83±5.96）％;IR＋生理盐水对照组vs.IR＋解酒药组,P＜0.01;IR＋生理盐水对照组vs.IR＋解酒药＋ cyanamide组,P＜0.01;IR＋解酒药组vs.IR＋解酒药＋cyanamide组,P＜0.01].Grp78、Chop、Caspase12蛋白水平于IR＋生理盐水对照组、IR＋解酒药组、IR＋解酒药＋cyanamide组中均无统计学差异（P＞0.05）.结论 在心肌缺血再灌注损伤早期,解酒药对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且抑制ALDH2后此作用消失,但其机制可能不是通过调控ALDH2参与的内质网应激而实现的.     

社区食管癌术后化疗患者的生存质量调查分析

目的探讨社区食管癌术后化疗患者生存质量的现状。方法对307例回归社区的食管癌术后化疗患者进行问卷调查,分析其生存质量现状。结果本组患者的总体生存质量得分为（46．45±25．58）分,明显低于Norwegian常模。分析结果显示影响总体生存质量的主要因素为化疗后生存时间（t=1．981,P〈0．05）,影响患者躯体功能的主要因素为有无并发症（t=3．256,P〈0．01）。影响患者情绪功能的主要因素为疼痛（t=-3．896．P〈0．01）,影响角色功能的主要因素为年龄（t=-1．625,P〈0．05）。结论社区食管癌术后化疗患者生存质量状况整体较差,人口社会学因素及疾病特征因素造成患者的社会功能、心理生理紊乱,从而影响了患者的生存质量。     

氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制

目的研究氯化钴(CoCl2)对N9小胶质细胞的损伤作用及机制。方法不同剂量CoCl2处理N9小胶质细胞后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;硫代巴比妥酸(TBA)显色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期变化。结果 CoCl2(50～1 000μmol.L-1)处理24 h后,细胞活力明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。细胞形态发生明显改变,部分细胞出现皱缩、破碎,细胞密度减小,随CoCl2剂量增大,细胞形态损伤程度进一步恶化。MDA含量检测结果显示,氯化钴处理后,细胞上清液中MDA含量明显增多(P<0.05)。Hoechst 33258染色结果显示,氯化钴处理组的细胞凋亡比例较对照组明显增多(P<0.01),且比例随CoCl2剂量增大而增多。细胞周期检测结果显示,CoCl2可使细胞周期阻滞于G1/G0期。结论 CoCl2可呈剂量依赖性损伤N9小胶质细胞,机制与诱导细胞凋亡、引发氧化应激反应及细胞周期阻滞有关。     

氧化苦参碱对大鼠心肌梗死后P38MAPK及IL-18的影响

目的:观察氧化苦参碱对异丙基肾上腺素诱导的大鼠心肌梗死的作用,以及对IL-18、P38MAPK表达的影响,探讨氧化苦参碱保护心肌细胞的可能机制。方法:50只成年雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、p38抑制剂SB203580组(10μmol/L/kg即0.004mg/kg)、低浓度(25mg/kg)及高浓度(50mg/kg)氧化苦参碱组。大鼠给予相应的药物腹腔注射,连续5天,于第6天,腹腔注射后约10分钟,模型组、P38抑制剂组、氧化苦参碱组采用多点皮下注射异丙肾上腺素诱导大鼠心肌梗死模型连续3天,通过TTC染色观察心肌梗死面积的变化,HE染色观察心肌组织病理变化,RT-PCR观察P38MAPKmRNA的变化,ELISA法分析血清中IL-18、TNF-α的水平。结果:与正常对照组相比,各组大鼠IL-18、TNF-α显著上升,P38mRNA表达明显升高,TTC染色出现心肌梗死。25、50mg/kg氧化苦参碱组与模型组相比,P38mRNA表达降低,IL-18、TNF-α分泌减少,TTC染色心肌梗死面积明显减小。0.004mg/kg P38MAPK组与模型组相比,P38mRNA表达降低,TNF-α分泌减少,TTC染色心肌梗死面积明显减小,而IL-18无统计学意义。结论:氧化苦参碱对异丙肾上腺素诱导的急性心肌梗死模型大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与降低IL-18、P38MAPK达到抗凋亡、抗炎的作用有关。     

酸枣仁汤对失眠症疗效及血浆褪黑素水平的影响

目的探讨酸枣仁汤对失眠症的疗效及对血浆褪黑素水平的影响。方法选用酸枣仁汤治疗失眠症,采用匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）量表评定睡眠状况,采用放射免疫法测定血浆褪黑素水平,观察其治疗前后的变化,并与正常对照进行比较,统计分析分别采用t检验、F检验和直线相关分析。结果治疗前患者PSQI总分明显高于正常对照组（f=3．282,P=0．002）,治疗后患者PSQI总分下降（r=2．371,P=0．007）;患者组治疗前、治疗后和正常对照组血浆MT水平分别为（45．81±13．23）pg／ml、（49．01±16．53）pg／ml和（54．86±18．35）pg／ml,组间比较有差异显著意义（F=5．004．P=0．009）,治疗前明显低于正常对照组和治疗后MT水平;治疗前MT水平与PSQI总分、睡眠质量因子分、入睡时间因子分分剐呈负相关关系（P〈0．05或P〈0．01）。结论酸枣仁汤治疗失眠有明显的疗效,其作用机制可能与MT水平调节有关。     

大鼠心肌组织中网状纤维组织学构筑及增龄变化

目的 观察大鼠心肌组织发育过程中网状纤维的组织学构筑特点和增龄变化,为探讨心肌组织重构特点奠定基础. 方法 利用石蜡切片、Gomori银染,光镜下观察胎鼠(孕约19d)、新生(9d)、青年(8个月)、老年(14个月)SD大鼠心肌组织网状纤维的组织学构筑特点,Western blotting检测Ⅲ型胶原蛋白随年龄变化的表达差异.利用图像分析系统对心室肌组织内网状纤维进行定量分析. 结果 网状纤维分为粗、细纤维,围绕在心肌细胞周围.胎鼠心肌细胞周围网状纤维呈细小线状或缺如,新生鼠的心肌细胞周围网状纤维逐渐增多,形成连续的网状纤维膜,相邻肌细胞之间出现间隙,随年龄而增宽,网状纤维近平行分支填充于间隙内.网状纤维所占面积百分比随年龄增加发生改变.Ⅲ型胶原(网状纤维)表达量随年龄增加发生改变,新生鼠到青年鼠是急剧增加阶段.结论大鼠心肌组织中网状纤维构成肌细胞周围的粗、细纤维鞘成分,并发出分支充填于心肌细胞之间和心肌细胞与间质之问的间隙内,Ⅲ型胶原蛋白量随年龄的变化发生改变.     

体外转染KISS-1基因对食管鳞癌细胞EC-1侵袭及增殖能力的影响

目的 观察KISS-1基因对食管鳞癌细胞EC-1侵袭及增殖能力的影响,探讨KISS-1基因与食管鳞癌生物学行为的关系.方法 检测KISS-1在EC-1、Eca109、EC9706和TE-1四种食管癌细胞株中的表达;利用脂质体介导在体外将KISS-1基因转染人食管鳞癌细胞EC-1,利用Western blot和RT-PCR方法检测转染之后KISS-1表达的改变,并采用Boyden小室体外侵袭实验及MTT、软琼脂克隆形成实验,观察KISS-1对食管鳞癌细胞侵袭及增殖能力的影响.结果 4种食管癌细胞株的Western blot和RT-PCR检测结果显示:EC-1中KISS-1蛋白(0.715±0.109)及mRNA(0.670±0.176)表达均最低;转染之后Western blot和RT-PCR结果显示:KISSS-1蛋白和mRNA在转基因组的表达分别为1.143±0.218和0.877±0.162,均显著高于转空质粒组(0.745±0.130,0.685±0.128;t=3.850,2.481,P均<0.05)和对照组EC-1细胞(0.855±0.184,0.677±0.138;t=2.275,2.306,P均<0.05);Boyden小室检测细胞体外侵袭力实验发现转基因组在培养24、48和72 h后的穿膜细胞数分别为91.8±11.7,117.8±11.1和139.2±11.8,均显著低于转空质粒组(118.1±14.7,141.7±13.2,162.2±22.7;t=3.153,4.215,3.569,P值均<0.01)和对照组EC-1细胞(112.2±15.6,138.1±13.0,162.3±14.0;t=4.154,3.797,2.702,P值均<0.05).MTT检测结果显示,转基因组细胞在培养48 h和72 h后的增殖能力分别为0.517±0.127和0.394±0.137,与转空质粒组(0.636±0.186,0.513±0.150;t=2.054,2.709,P值均<0.05)和对照组(0.646±0.135,0.511±0.153;t=2.276,2.205,P值均<0.05)相比,细胞生长受到明显抑制;克隆形成实验结果显示,转基因组细胞的克隆形成数为157.2±36.4,明显低于转空质粒组(236.3±78.1;t=3.441,P<0.01)和对照组(242.5±48.6;t=2.250,P<0.05).结论 KISS-1基因在食管癌细胞株EC-1中可抑制细胞的体外侵袭能力及细胞的增殖能力.